2025年9月24日晚19时，黄波课题组本学期第三次Journal Club活动准时拉开帷幕。本次活动由三年级直博生袁武主讲，带来的是斯坦福大学医学院William H. Robinson与Mark M. Davis团队的重磅研究——该团队于2023年1月在《Nature Communications》发表的《Cytotoxic CD8+ T cells target citrullinated antigens in rheumatoid arthritis》，聚焦类风湿关节炎（RA）中细胞毒性CD8+T细胞的抗原识别与致病机制。汇报结束后，课题组围绕“T 细胞免疫调控与RA发病”展开热烈研讨，为在场成员搭建了一场兼具理论深度与实践价值的学术交流平台。袁武以RA研究领域的“关键未解之谜”为起点，清晰梳理了这篇文献的科学脉络。他首先提到，抗瓜氨酸蛋白抗体阳性（ACPA+）是RA的重要特征，临床诊断中早已常用，但这些抗瓜氨酸蛋白的免疫反应究竟如何推动RA发展、尤其是细胞毒性CD8+ T细胞是否直接参与关节组织破坏，一直缺乏明确的实验证据——而这正是该研究要突破的核心问题。

顺着研究的实验设计思路，袁武逐步拆解了四大关键发现：首先是CD8+ T细胞的 “功能身份” 确认。研究通过对ACPA+ RA患者外周血的分析发现，这些患者的CD8+ T细胞存在明显的克隆性扩增，而且扩增的细胞普遍表达高水平颗粒酶B（GZMB）、穿孔素等细胞毒性分子，同时带有活化标志物，完全是“随时准备杀伤”的效应细胞表型，这说明它们很可能不是“旁观者”，而是直接参与损伤的“执行者”。

其次是“抗原如何激活细胞”的机制突破。为了验证激活通路，研究团队做了抗体封闭实验：当用抗HLA I类抗体或抗CD8抗体处理后，瓜氨酸化抗原（比如波形蛋白、组蛋白H3这些在RA中常被修饰的蛋白）就没法激活CD8+ T细胞了。这直接证明，ACPA+ RA患者的CD8+ T细胞激活，必须依赖HLA I类分子提呈瓜氨酸化抗原。袁武特别解释，这里还有个关键细节：瓜氨酸化抗原很多是细胞外的，按常理HLA I 类分子主要提呈胞内抗原，所以研究推测这些胞外抗原可能通过 “交叉提呈”—— 也就是被抗原提呈细胞摄取后，进入 HLA I类提呈通路——才激活了CD8+ T细胞，这为理解 “胞外抗原触发胞内杀伤T细胞” 提供了新角度。

第三是单细胞层面的 “亚群分工” 发现。研究用单细胞转录组结TCR测序，把ACPA+ RA患者的CD8+ T细胞分成了7个亚群，其中最关键的是GZMB+和GZMK+两个效应亚群。对比发现，GZMB+亚群的克隆扩增能力最强，还高表达趋化因子受体这类 “组织归巢” 分子，像是 “精准定位关节” 的杀伤细胞。更重要的是，团队做了血液和滑膜的配对样本分析：血液里扩增的GZMB+ GNLY+ CD8+ T细胞，在患者的滑膜组织里也大量存在，而且这些细胞的TCR克隆型和基因表达特征高度一致，等于直接把 “外周血的激活细胞” 和 “关节里的损伤细胞” 联系了起来，证明它们确实会迁移到病变部位发挥作用。

最后还有临床转化的潜在价值。研究发现，用类似检测结核的Quantiferon方法，直接取ACPA+ RA患者的新鲜全血，就能检测到对瓜氨酸化抗原的CD8+ T细胞反应，这意味着未来可能开发出更精准的RA诊断技术。不过袁武也提到，研究还有待完善的地方，比如观察到ACPA+ RA的CD8+ T细胞对某些肿瘤细胞有“非HLA依赖”的杀伤，推测可能和γδ  TCR+ CD8+细胞有关，但这类细胞比例很低，它们是否真的针对瓜氨酸化抗原，还需要更多实验验证。

他的总结点燃了在座同学的思考热情。随后，陈洁，唐亮，王殿恒，庞建峰等同学围绕这群Cytotoxic CD8+ T细胞在ACPA+ RA患者中发挥功能的具体机制，研究中RA患者的病情程度选择，瓜氨酸化蛋白是如何修饰并激活CD8+ T细胞，以及针对ACPA+ RA患者后续治疗靶点的选择进行了充分讨论和交流。唐亮更是结合自身实验经历为在场同学分享了利用T细胞对MHC-peptide识别原理如何寻找抗原表位的想法。

这次JC里，袁武顺着 “提出问题-设计实验-验证结论”的逻辑，把复杂的机制讲得清晰易懂，让大家不仅了解了研究结果，更学到了“如何围绕关键科学问题设计实验”的思路。而现场的讨论则从机制细节、实验设计到临床转化，层层深入，尤其是结合自身实验经历的分享，让理论知识落地到了实际操作中。这场交流不仅深化了对RA免疫调控的理解，也让大家更清晰地看到后续研究可切入的方向——比如如何验证特定瓜氨酸化抗原的致病性、如何针对CD8+ T细胞亚群设计干预策略等。